基因工程实验指导

内容概要

为了适应学科的发展与实际需要，本实验教材在第1版的基础上进行了修改和补充，扩展了部分实验内容，增加了一些最新进展的实验技术，由原来的35个实验增加为49个实验，使其在内容上更加丰富和完善。第2版的编写除了继续保持第1版的写作特点和基本要求外，着重扩充了基因的克隆、鉴定方法以及蛋白质化学分析的一些新技术和新发展，此外还添加了部分真核生物酵母的实验。书中选用了一批新的插图、照片，以使教材内容形象、直观，可读性强。
本教材中所有实验比较系统地介绍了与实验内容相关的基本原理，强调指出了实验中的注意事项，并对与实验相关的内容进行评议，以利于读者更好地理解实验，起到实验指南的作用。书末附录部分还包含了试剂的配制等内容，方便读者参考。本教材可作为本科生或者研究生的基因工程实验教学的参考书。

书籍目录

实验计划表
导论
1  基因文库的构建
  1一l  染色体DNA的提取
  1-2  总RNA和mRNA的提取
  1-3  λ噬菌体DNA的提取
  1-4  染色体DNA的部分消化
  1-5  基因组文库的构建
  1-6  cDNA合成
  1-7  cDNA文库的构建
2  目的基因的获得
  2-1  PCR扩增
  2-2  核酸电泳
  2-3  目的基因片段的获得
  2-4  核酸探针的标记及检测
  2-5  核酸探针筛选基因文库
  2-6  反转录PCR
  2-7  RACE PCR
  2-8  反向PCR
  2-9  Sitefinding-PCR
3  载体质粒的制备
  3-1  质粒DNA的提取与纯化
  3-2  核酸纯度、浓度与相对分子质量的测定
4  扩增质粒的构建
  4-1  限制性内切酶的酶切反应
  4-2  凝胶电泳法进行DNA的分离与纯化
  4-3  DNA片段的体外连接
  4-4  T-A克隆
5  重组DNA导入宿主细胞
  5-1  感受态细胞的制备
  5-2  重组质粒的转化
  5-3  外源基因在毕赤酵母中的转化与整合
6  重组子的筛选与鉴定
  6-1  阳性克隆的筛选
  6-2  DNA序列测定
  6-3  序列同源性分析
  6-4  DNA印迹
  6-5  菌落原位杂交
  6-6  荧光原位杂交
7  表达质粒的构建与诱导表达
  7-1  表达质粒的构建与转化
  7-2  RNA印迹
  7-3  外源基因的诱导表达
  7-4  蛋白质浓度的测定
  7-5  SDS-PAGE
  7-6  蛋白质印迹
8  蛋白质样品的分析
  8-1  等电聚焦电泳
  8-2  双向电泳
  8-3  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
  8-4  酶联免疫吸附测定（ELISA）
  8-5  蛋白质生物功能测定
  8-6  酶活性的测定
9  工程菌的培养与目的产物分离
  9-1  发酵条件的优化
  9-2  包含体的复性
  9-3  诱导表达蛋白质的分离沉淀
  9-4  凝胶过滤层析
  9-5  离子交换层析
  9-6  亲和层析
附录1  简写
附录2  实验注意事项
附录3  如何撰写实验报告
附录4  常用碱基、氨基酸符号及缓冲液
附录5  大肠杆菌基因型
附录6  培养基与试剂的配制
附录7  实验仪器
参考文献

图书封面

评论、评分、阅读与下载

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